Artemisia artemisinine, extractie, malaria INHOUD IN ARTEMISIA ANNUA L EXTRACTEN ONTVANGEN DOOR VERSCHILLENDE METHODEN

INHOUD VAN ARTEMIZININE IN ARTEMISIA ANNUA L-EXTRACTEN VERKREGEN DOOR VERSCHILLENDE METHODEN Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Padnaeed Buryat State University, st. Smolin, 24a, Ulan-Ude (Rusland) Tomsk State University, 36, Lenina Ave., Tomsk (Rusland) Baikal Institute for Nature Management, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Rusland)

Vragen over de isolatie van artemisinine van Artemisia annua L. en de kwantitatieve bepaling ervan met behulp van de HPLC-MS-methode worden overwogen. Artemisinine werd geïsoleerd door verschillende extractiemethoden: maceratie, echografie en subkritische CO2-extractie. De componentsamenstelling van CO2- en hexano-extracten werd bestudeerd met behulp van GC-MS.

introductie

Artemisinine (1) is een peroxide sesquiterpene [1], een zeer effectief antimalariageneesmiddel en een voorloper van krachtiger verbindingen, zoals artemether, artesunaat en enkele andere. Het belang van artemisinine en zijn derivaten is gebaseerd op de zeer snelle werking van een verbinding van dit type tegen de belangrijkste ziekteverwekker Plazmodium falciparum, die ook hersenziekten veroorzaakt. De chemische en biochemische synthese van artemisinine is erg duur gebleken en daarom momenteel niet levensvatbaar als de belangrijkste bron van artemisinineproductie [2].

Malaria wordt veroorzaakt door een micro-organisme - Plasmodium-malaria. Er zijn 4 soorten plasmodium, parasitair in het menselijk lichaam: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae en P. falciparum. In het midden van de 20e eeuw was het dankzij het wijdverspreide gebruik van kinine en zijn derivaten mogelijk om het aantal patiënten met malaria aanzienlijk te verminderen. Echter, sinds de jaren 60. malaria uit de vorige eeuw werd opnieuw aan zichzelf herinnerd. Dit kwam door het feit dat in Thailand en Zuid-Amerika malaria Plasmodium (P. falciparum), resistent voor kinine, chloroquine, mefloquine en andere op chinoline gebaseerde geneesmiddelen, verscheen en zich verspreidde in andere regio's [3,4]. Het probleem van het vinden van nieuwe effectieve antimalariamiddelen, waaronder artemisinine werd voorgesteld, is actueel geworden. Deze unieke samenstelling werd ontdekt in China (de Chinese naam is qinghaosu). De werken werden gestart in 1967 en werden "Programma 523" [5] genoemd. Het is geïsoleerd van de alsem van de jaarlijkse Atemisia annua L., die wordt gedistribueerd op het grondgebied van de voormalige USSR en die gebieden omvat van Altai, Transbaikalia, Amur, Kazachstan, Kirgizië, Oezbekistan en Turkmenistan. Alsem is wijd vertegenwoordigd in China en andere landen [6]. De totale hoeveelheid artemisinine geïsoleerd uit verschillende delen van A. annua is ongeveer 0,01 en 1,4% van de droge bladmassa [2].

Artemisia annua L. is de belangrijkste grondstof voor de productie van artemisinine. De Wereldgezondheidsorganisatie heeft in 2001 het gebruik van artemisinine in de eerstelijnstherapie voor malariacontrole aanbevolen, wat heeft geleid tot een toename van het areaal onder eenjarige alsem. Meestal wordt alsem jaarlijks geteeld in Oost-Azië, voornamelijk in China en Vietnam (70% van het areaal uit de wereldvoorraad), onlangs geïntroduceerd in cultuur in Oost- en Zuidelijk Afrika (20% van het areaal van de wereldvoorraad), dat een kwart van de wereldwijde gezondheidsbehoeften biedt [7].
Naast artemisinine wordt A. annua gewaardeerd om zijn essentiële olie, die een karakteristiek zoet, grasachtig aroma heeft en wordt gebruikt in parfumerieën en cosmetische producten. Bovendien heeft de olie antibacteriële eigenschappen en kan deze worden gebruikt om huidziekten te behandelen. Naast sesquiterpene lactonen, die de belangrijkste therapeutische waarde hebben, bevatten de etherische oliën van deze plant een significante hoeveelheid componenten die waarde hebben, zoals 1,8-cyneol, artemisia alcohol en keton, borneol en anderen, de vetzuursamenstelling van eenjarige alsem is onlangs bestudeerd, en analyseerde ook het fysiologische effect van lipofiele extracten op de huid [2].
In verband met de rijke en gevarieerde samenstelling van biologisch actieve stoffen in Artemisia annua, is het zoeken naar nieuwe groeigebieden van alsem als jaar van groot belang. In de republiek Buryatia groeien er 46 soorten polynum [8], waaronder Artemisia annua L. Het gehalte aan artemisinine in Polen, dat een jaar oud is en in Buryatia groeit, is niet eerder bestudeerd. Daarom was het doel van dit werk de kwantitatieve bepaling van artemisinine in extracten verkregen door verschillende extractiemethoden.

Experimenteel gedeelte

De grondstof voor de studie werd geselecteerd boven de grond deel van de Poolse jaarlijkse Artemisia annua L., verzameld in het eerste decennium van augustus 2010, in de bloeifase.
Isolatie van artemisinine en andere biologisch actieve stoffen (etherische olie) werd uitgevoerd met behulp van verschillende extractiemethoden: maceratie, ultrasone extractie en subkritische CO2-extractie. Extractie werd uitgevoerd op laboratoriuminstallaties. Hexaan, ethylacetaat, ethanol en CO2 werden als extractiemiddelen gebruikt. De gegevens en extractieparameters worden getoond in Tabel 1. Extracten van het precipitaat werden gescheiden door centrifugatie in een OP-8UHL4.2 centrifuge bij 5000 rpm en vervolgens gefilterd door een monster filtratiesysteem.
De kwantificering van artemisinine werd bepaald met behulp van HPLC-MS met behulp van een Finnigan Surveyor-vloeistofchromatograaf met hoog prestatievermogen uitgerust met een autosampler Plus-autosampler en een LC Pump Plus-pomp met een LCn Advantage MAX (ion-trap) Finnigan-detector, ionisatiemethode - electrospray. Kolom "Hypersyl Gold" 150 x 4 mm, gevuld met silicagel sorptiemiddel met C18 geënte fasen (deeltjesgrootte 5 μm), (vervaardigd door Thermo electronic corporation, USA). Elutie werd uitgevoerd in isocratische modus (50% (A): 50% (B)), de samenstelling van de startbuffer (A) was een waterige oplossing van mierenzuur, (pH = 3) + 2 ml van een verzadigde oplossing van ammoniumacetaat, elutiebuffer (B) - 100% acetonitril. De volumetrische stroomsnelheid van het eluent is 0,5 ml / min, het volume van het geïnjecteerde monster (autosampler) is 25 μl. Ionenregistratie werd uitgevoerd in de bewakingsmodus van positief geladen ionen (Selected Ion Monitoring, SIM), met een molecuulmassa van 300 (vanwege de toevoeging van ammoniumion NH4 aan het artemisinine-molecuul) met een vensterbreedte (299-301) m / z. Kwantitatieve bepaling werd uitgevoerd met behulp van de interne standaardmethode met gebruikmaking van het standaardstandaardmonster van Sigma.

Extractiemethoden en parameters

Nr. P / p Extractiemethode Extractiemiddel Extractietijd / extractieparameters Artemisininegehalte in%, uitgedrukt in a.s.s.
1 Maceratie van ethanol 24 uur / grondstoffen: oplosmiddelratio (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 Maceratie ethanol 48 h / grondstoffen: oplosmiddelverhouding (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Maceratie van hexaan 24 uur / verhouding van monster: oplosmiddel (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Ultrasone extractie ethanol 15 min / verhouding van grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), sondeerfrequentie 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Ultrasone extractie ethylacetaat 15 min / grondstoffen: oplosmiddelverhouding (1: 5), sondeerfrequentie 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 CO2-extractie so2 24 uur / stroomsnelheid 30 l / uur, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Bovendien werden de vluchtige componenten van CO2- en hexaan-extracten onderzocht door chromatografie-massaspectrometrie op een Agilent Packard HP 6890-gaschromatograaf met een MSD 5973N quadrupooldetector. We gebruikten een 30-meter kwartszuil TR-5 ms met een interne diameter van d = 0,25 mm, een filmdikte van 0,25 μm. Chromatografische scheiding werd uitgevoerd zoals beschreven in [9]. De componenten van de extracten werden kwalitatief bepaald door de totale massaspectra te vergelijken met de gegevens van een chromatograaf van massaspectrometriegegevens van vluchtige stoffen van plantaardige oorsprong A. Tkachev, bibliotheken NIST 08 en Wiley 275. De resultaten van de analyse zijn weergegeven in tabel 2.

De belangrijkste componenten van CO2- en hexaanextracten
Piek gebied relatieve verbindingen Piek gebied relatief
Verbindingen van CO2-extract hexaan extract
CO2-extract Hexaan-extract
Monoterpenoids langketenige koolwaterstoffen
Tricycyleen 140181 - Tricosane 103969 52288
a-pinene 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentacosane 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-heptacosaan 279800 132358
3-careen

Cyclische koolwaterstoffen
limoneen
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8).0 (5.14) 0.
1,8-cineol 133599 - (7,11)] tetradecaan
Artemisia keton 1413437 - 1,8-dimethylphenanthrene 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Bornylacetaat

diterpenoïden
sesquiterpenoïden
Methyl 3,5-bis (ethylamino) benzoaat 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Karyofillen oxide
Germacren D 214913 -
R-Selinene 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Bespreking van de resultaten

Zoals blijkt uit de gegevens in tabel 1, was de laagste opbrengst van artemisinine (0,022%) met ultrasone extractie met ethylacetaat. Het gehalte aan artemisinine in extracten geïsoleerd door ultrasone extractie en maceratie met verschillende oplosmiddelen (hexaan, ethylalcohol) is niet significant verschillend 0,038-0,040% in termen van A. p. Wanneer men aandringt op ethylalcohol alsem per jaar gedurende 24 en 48 uur, is het gehalte aan artemisinine in de verkregen extracten ongeveer hetzelfde als respectievelijk 0,040 en 0,038%. De hoogste opbrengst van artemisinine (0,054%) werd verkregen tijdens de pre-kritische CO2-extractie. Ter vergelijking presenteren we enkele gegevens over de inhoud van artemisinine, in eenjarige alsem, die in verschillende territoria groeit. Artemisia annua L., die in verschillende delen van China groeit, bevat 0,01 tot 0,22% artemisinine. Sommige hybriden van eenjarige alsem die in China en Vietnam worden geteeld, bevatten 1,0-1,5% artemisinine [10]. De inhoud van artemisinine in A. annua, groeiend op het grondgebied van de voormalige USSR, is als volgt (waarden worden gegeven in termen van luchtdroge grondstoffen): Georgische SSR (0,005%), Kirgizische SSR (0,025%), Moldavische SSR (0,01-0,02%), Krasnodar Territory (0,04%), Oekraïense SSR (0,005-0,05%), Turkmenistan (0,05% in termen van a.s.c.), Kazachstan (0,01-0,05% uitgedrukt in termen van A.S.S.) [11].
In de studie van de samenstelling van de extracten van eenjarige alsem, verkregen door CO2-extractie en maceratie, onthulde chromatografie-massaspectrometrie wanneer hexaan als extractiemiddel werd gebruikt, significante verschillen in de samenstelling van deze extracten. Monoterpenoïden, sesquiterpenoïden, koolwaterstoffen met een lange keten, cyclische koolwaterstoffen en diterpenoïden worden gedetecteerd met behulp van de massaspectrometrische methode.
Monoterpenoïden komen alleen voor in het CO2-extract. De belangrijkste componenten van het CO2-extract zijn a-pineen, 3-caren, artemisia keton, (3-seleneen, tricozen-1, 1,8-dimethylfenantreen en fluoreen.

In het hexaan-extract van alsem door jaarlijkse gaschromatografie-massaspectrometrie werden voornamelijk koolwaterstoffen met lange ketens en cyclische koolwaterstoffen geïdentificeerd, 3-seleen werd gedetecteerd uit sesquiterpenoïden.
Naast artemisinine, dat van primaire geneeskrachtige waarde is, bevat de essentiële olie een groot aantal componenten van biologische waarde, zoals artemisia keton, 1,8-cyneol, borneol, enz.

bevindingen

1. Het gehalte aan artemisinine in verschillende extracten van A. annua (luchtdeel, bloeifase) dat op het grondgebied van de Republiek Boerjatië groeit, werd bepaald door middel van HPLC-MS.
2. Het maximale artemisininegehalte is te vinden in het CO2-extract (0,054% in termen van a.s.c.),
3. Met behulp van chromatografie massaspectrometrie werd de samenstelling van de essentiële olie geëxtraheerd met behulp van verschillende extractiemethoden bestudeerd.

Artemisia annua L.
BTW beschrijving

Russische namen

taxonomie

image

Planten op de kaart

Botanische beschrijving

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. in Nouv. Mem. Soc. Nat. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; Ldb. Fl. Ross. II, 592; Boiss. Fl. of. III, 371; Maxim. in Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Hook. Fl. Br. Ind. III, 323; Com. in fl. Manchu. III, 659; Nakai, Fl. Koreaans. II, 30; Fedch. Adyge. sol. Turk. IV, 200; Rydb. Noord Am. Fl. 34, deel 3, 259; Pampan. in Nuov. Giorn. Bot. Ital. N.S. XXXIV, 637; Hall en Clem. Artem (1923) 102; Com. en Alice. Res. sol. Verre Oosten kr. II, 1036; Krasheniny. in fl. Zuid-Oost. Europ. Deel USSR, VI, 357; Grossg. Fl. Kavko. IV, 138; Krasheniny. en Wings. Fl. Zap. Sib. XI, 2816; Polyak. in Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. in Tr. Petersburg University. bot. Garden, X, 87; Fedch. op. Op. - Ic.: Amm. Stirp. rar. t. 193, f. 23; Gmel. Fl. sib. II tab. 25. - Exs.: ГРФ № 3152. - Eenjarige Alsem.

Jaarlijkse. De plant is geurig, groen, kaal of met verspreide, kleine aangrenzende haren, met een rechte, geribbelde, bruinige of paarsbruine stengel van 30-100 cm lang; bladeren zijn gestippeld - fossa-ijzerhoudend, lager gesteeld, 3-5 cm lang. en 2-4 cm breed., ovaal, driemaal pinnaculair, segmenten van de laatste orde langwerpig gelobd, korte puntig; geheel of met 1-2 tanden, 1-2 mm lang. en 0,5 mm breed; midden- en stengelbladen zijn dubbel geveerd, hoger zittend, kleiner en minder complex, de bovenste schutbladen zijn eenvoudig of met een klein aantal zijlobben. Manden zijn bolvormig, 2-2,5 mm breed, talrijk, afgewezen of hangend, op korte benen, samengetrokken op korte takken, in b. m. lange, piramidale pluimen bloeiwijze; de verpakking is glad, de buitenste bladen zijn lineair langwerpig, groen, inwendig ovaal of bijna rond, met een breedgerande glanzende rand rondom de rand; bakje bol, kaal; marginale pistillaatbloemen, 10-20 in aantal, kroondraadvormig, dot-glandular, eng lineaire, stigma lobben, stompe, blootgesteld van een buis; schijfbloemen zijn biseksueel, 12-30 in aantal, buisvormig met smalle dop, naakt; helmknoppen eng lineair, bovenste aanhangsel langwerpige, acuut gebogen, basale lobben zeer kort, puntig; de kolom is korter dan meeldraden, het stigma van het stigma is lineair, recht, enigszins afwijkend, aan de top gekruld; achenes 0.8-0.6 mm lang., langwerpig-eivormig, plat, aan de top met een klein afgerond platform, nauwelijks langs de rand afgezet. Col. VIII - IX.

Op weedy plaatsen in de buurt van woningen, tuinen, in tuinen. - Europa. h.: Upper Dniester., Upper Dnieper., Volzh. Don., Volga., Lower. Don., Black., Bess., Crimea; Kaukasus: westers en oosters. Trans., Tal., Wed. Azië: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Syr-Dar., Pam. - Al., Amu-Dar., Horn. Turkmeens. Tot. var.: wo Hebr.: Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iran, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolia, North. Amerika (alien).

Het type weergave is de tekeningen van Amman en Gmelin.

Huishoudens. VAL. De opbrengst aan etherische olie is 0,1-0,64% (volgens Goryaev). Volgens Joshikazu Imade (1937) zitten cineol en stof C10H6O in de olie; deze substantie is in detail bestudeerd door Ashania en Joshitomi (1917); samen met artemacyaketon, is de isomeer, isoartemisieaceton, aangetroffen in olie. Dit keton kon isoleren van de moederloog die achterbleef bij de bereiding van artemacyaceton semicarboson. Seisi Takagi (1928), voortzetting van de studie van de Japanse A. annua, tot de 4 componenten bekend in olie toegevoegd 2 meer nieuwe: cadinene en karyophillen. Op basis van het onderzoek van Rutovsky en Vinogradov (1929), bestaat de olie uit α-pineen, cyneol, camphene, artemisiaketon en isoartemisieseketon, een kleine hoeveelheid borneol, azijnzuur en boterzuur, kimuno-aldehyde (vermoedelijk semicarboson) en fenol (waarschijnlijk eugenol). Een kleine hoeveelheid alkaloïden werd aangetroffen in de ondergrondse delen (Lazurievsky, Sadykov, 1939; Massagetov, 1947). Volgens observaties in het veld (Yunatov, 1954) wordt in de groene staat niet door vee gegeten. De aanwezigheid van alkaloïden wordt bevestigd door M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Samenvatting en proefschrift over geneeskunde (04/14/02) over het onderwerp: Farmacognostische studie van Artemisia annua L. en Artemisia sieversiana Willd. flora van Buryatia

Samenvatting van het proefschrift in de geneeskunde over het onderwerp Farmacognostische studie van Artemisia annua L. en Artemisia sieversiana Willd. flora van Buryatia

Als een manuscript

Soktoeva Tuyana Erdemovna

FARMACOGNOSTISCH ONDERZOEK ARTEMISIA ANNUA L. EN ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLORA VAN BURYATIA

04/14/02 - farmaceutische chemie, farmacognosie

Samenvatting van het proefschrift voor de graad van kandidaat van de farmaceutische wetenschappen

Het proefschrift werd uitgevoerd bij de Federal State Budget Educational Establishment van het hoger beroepsonderwijs "Buryat State University" van het ministerie van Onderwijs en Wetenschappen van de Russische Federatie en de oprichting van de Russische Academie van Wetenschappen van het Baikal Institute of Environmental Management, Siberian Branch van de Russische Academie van Wetenschappen

Promotor: Doctor in de chemische wetenschappen, professor

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Officiële tegenstanders: doctor in de biologische wetenschappen, professor

Antsupova Tatjana Petrovna

Kandidaat voor Farmaceutische Wetenschappen Mongolov Hanhai Purbuevich

Toonaangevende organisatie: Permstaat

Ministeries van Volksgezondheid en Sociale Ontwikkeling van de Russische Federatie

De verdediging vindt plaats op 23 december 2011 om 10 ° uur tijdens de vergadering van de Dissertatieraad DM 003.028.02 van het Instituut voor Algemene en Experimentele Biologie van de SB RAS op het adres: 6, Sakhyanova St., Ulan-Ude, 670047.

Het proefschrift is verkrijgbaar bij de Centrale Wetenschappelijke Bibliotheek van het Wetenschappelijk Centrum Buryat van de SB RAS.

Het abstract gepubliceerd op 22 november 2011.

Wetenschappelijk secretaris van de Dissertation Council Candidate of Biological Sciences

ALGEMENE BESCHRIJVING VAN HET WERK Relevantie van het onderwerp. Planten van het geslacht Artemisia (alsem) zijn veelbelovende bronnen van biologisch actieve stoffen, zoals de dragon-alsem Artemisia dracunculus L., de alsem Artemisia absinthium L., de alsem Artemisia vulgaris L. wordt veel gebruikt in de volks-, traditionele geneeskunde en voedingsindustrie. Artemisia annua L., een jaarlijkse alsem, werd in veel landen met succes in cultuur geïntroduceerd en werd in 2001 door de WHO aanbevolen als de belangrijkste bron van artemisinine, de eerstelijnsbehandeling voor malaria. Tegenwoordig bieden landen die artemisinine produceren ongeveer een kwart van de wereldwijde gezondheidsbehoeften (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). 137 biologisch actieve verbindingen werden geïsoleerd uit de een jaar oude, waaronder 40 sesquiterpenen, 10 triterpenen, 7 coumarines, 46 flavonoïden, die kunnen dienen als basis voor de ontwikkeling van geneesmiddelen (Bhakuni, 2001). In de jaren 80 van de 20e eeuw probeerde een groep wetenschappers (Schroeter, 1989) het wildgroeiende deel van de eenjarige flora van de USSR te cultiveren in de CISA (Moskou). Tegenwoordig worden grote werken aan de introductie van het eerste jaars item uitgevoerd aan de Tomsk State University. In Buryatia n. Annual is een in het wild groeiende soort.

Samen met de jaarlijkse parasiet in Buryatia, Sivers alsem Artemisia sieversiana Willd. Is wijdverbreid, wat ook een veelbelovende soort is. Het gras van Seabera bevat flavonoïden, etherische olie, coumarinen (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). Siver essentiële olie is van belang als een bron van chamazuleen, een niet-toxische verbinding met ontstekingsremmende, bacteriedodende, regeneratieve effecten (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Tot nu toe is een gedetailleerde chemische studie van de alsem alsem van Sivers en alsem van de jaarlijkse flora van Buryatia niet uitgevoerd als veelbelovende bronnen van biologisch actieve stoffen, daarom is hun studie een dringende taak.

Doel: Farmacognostische studie van Servels alsem Artemisia sieversiana Willd. en alsem jaarlijks Artemisia annua L. als waardevolle bronnen van biologisch actieve stoffen.

Om dit doel te bereiken, is het noodzakelijk om de volgende taken op te lossen:

1. Identificeren van de anatomische en diagnostische tekens van het bovenstuk van Sivers en P. 1-jarige, om merchandisingindicatoren vast te stellen

grondstoffen, beoordeling van de reserves en de mogelijkheid van het oogsten van een jaar en p. Siversa op het grondgebied van de Republiek Boerjatië;

2. Om de chemische samenstelling van de hoofdgroepen van biologisch actieve stoffen van deze planten te bepalen en hun kwantitatieve inhoud te bepalen, de lokalisatie van essentiële oliën en artemisinine in individuele delen van planten vaststellen, de dynamiek van hun accumulatie in de ontwikkelingsfasen bestuderen en de optimale verzamelingsomstandigheden bepalen;

3. Een methode ontwikkelen voor de kwantitatieve bepaling van artemisinine in het bovengrondse deel van de eenjarige;

4. Bepaal de kwaliteitsindicatoren en -normen voor het gehalte aan basisch biologisch actieve stoffen, om regulerende documentatie voor medicinale grondstoffen te ontwikkelen - het gras van Sivers alsem en het gras van eenjarige alsem.

Wetenschappelijke nieuwigheid. De belangrijkste diagnostische kenmerken van het gras van Sivers en P. annual zijn vastgesteld, de numerieke indicatoren die nodig zijn voor de standaardisatie van grondstoffen zijn ontwikkeld.

Er is een studie gemaakt van de chemische samenstelling van het gras van Sivers en van het gras van een jaar oud. Het gehalte aan essentiële oliën, flavonoïden, vetzuren, macro- en micro-elementen werd bepaald. Flavonoïden - luteoline-7-glucoside, rutine, quercetine en chryoeriol werden gedetecteerd met de HPLC-MS-methode in deze planten. De belangrijkste vetzuren in de onderzochte soorten alsem zijn palmitisch, linolzuur, linoleenzuur, 10% octadekenisch zuur is ook te vinden in een grote alsem.

De voorwaarden voor de extractie van artemisinine (type extractiemiddel, extractiemethode, extractietijd) van het jaarlijkse kruid werden bepaald en er werd vastgesteld dat de maximale extractie van artemisinine wordt bereikt door ultrasone en subkritische CO2-extractie. Met HPLC-MS is vastgesteld dat de grootste hoeveelheid artemisinine bij de éénjarige zich in de bloeifase in de bloeiwijzen bevindt.

Bestudeerde de dynamiek van de accumulatie van essentiële olie, afhankelijk van de ontwikkelingsfase en een deel van de plant. De grootste hoeveelheid essentiële chamazuleenolie p. Siversa hoopt zich op in de fasen van ontluikende en bloeiende bloeiwijzen.

De vastgestelde kwaliteitsindicatoren van BAS zijn opgenomen in de regelgevingsdocumenten.

Praktische betekenis. De reserves en het mogelijke jaarlijkse volume van de aanbesteding van een regeling van Sivers en een regeling van een jaar op het grondgebied van de Republiek Boerjatië (afwikkeling van Sivers - van 0,1 tot 73,7 ton per jaar, en een afwikkeling van een jaar - van 1,2 tot 122,3 ton per jaar).

Er is een techniek ontwikkeld voor de kwantitatieve bepaling van artemisinine in P. Grass met een jaarlijkse HPLC-MS-methode. De omstandigheden voor de monstervoorbereiding van grondstoffen voor analyse voor de kwantitatieve bepaling van artemisinine zijn wetenschappelijk onderbouwd.

De standaardisatie van grondstoffen is uitgevoerd, FS-projecten zijn ontwikkeld - "Sivers Wormwood Herbal" en "Alsem-eenjarig gras".

De mate van implementatie. De methode voor het extraheren van essentiële olie en microscopische analysegegevens werd getest en geïntroduceerd in het onderwijsproces van het departement Farmacie bij de federale overheidsbegroting voor onderwijsinstellingen van hoger beroepsonderwijs "Buryat State University" (implementatiewet nr. 1 van 6 september 2011). Projecten van FS op gras met Sivers alsem en eenjarige alsem worden voorbereid voor overweging.

Aan de verdediging worden genomen:

• de resultaten van de studie van de anatomische structuur, voorraden, criteria van authenticiteit van Sivers en P., die groeien in Boerjatië;

• resultaten van een chemische studie van biologisch actieve stoffen en hun seizoensgebonden dynamiek van accumulatie;

• resultaten van studies over de standaardisatie van het bovengrondse deel van Sivers p. En p. Een jaar.

Approbatie van werk. De belangrijkste bepalingen van het proefschrift werden gepresenteerd en besproken op: een wetenschappelijk-praktische conferentie met internationale participatie "De ontwikkeling van de traditionele geneeskunde in Rusland: ervaring, onderzoek en vooruitzichten" (Ulan-Ude, 2010); 7th Winter Simposium on Chemometrics "Modern Methods of Data Analysis" (Sint-Petersburg, 2010); de internationale wetenschappelijke conferentie gewijd aan de 15e verjaardag van de "Actual Studies of Baikal Asia" van de Buryat State University (Ulan-Ude, 2010); V internationale wetenschappelijk-praktische conferentie "Prioriteiten en kenmerken van de ontwikkeling van de Baikal-regio" (Ulan-Ude, 2011); X internationale wetenschappelijk-praktische conferentie "Problemen van de plantkunde in Zuid-Siberië en Mongolië" (Barnaul, 2011); IV All-Russian Conference "Nieuwe ontwikkelingen in de chemie en chemische technologie van plantaardige materialen" (Barnaul, 2009); XVI Internationale conferentie van studenten, postgraduates en jonge wetenschappers "Lomonosov-2009" (Moskou, 2009); XV International Ecological Student Conference "Ecologie van Rusland en aangrenzende gebieden" (Novosibirsk, 2010); II All-Russian wetenschappelijk-praktische conferentie van studenten, graduate studenten en jonge wetenschappers "Technologieën en apparatuur van de chemische, biotechnologische en voedingsmiddelenindustrie" (Biysk, 2009); All-Russian wetenschappelijk-praktische conferentie "Vegetation

De Baikal-regio en aangrenzende gebieden "(Ulan-Ude, 2011); V School Seminar of Young Scientists of Russia "Problemen van duurzame ontwikkeling van de regio" (Ulan-Ude, 2009); de regionale jeugdwetenschappelijk-praktische conferentie met internationale participatie "Milieuvriendelijke en hulpbronnenbesparende technologieën en materialen" (Ulan-Ude, 2010).

Het werk werd uitgevoerd in het kader van onderzoeksprojecten: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Studie van de biogenetische patronen van biosynthese van biologisch actieve verbindingen van endemische planten in Centraal-Azië" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Chemische samenstelling van planten als indicator de staat van de ecosystemen van de Baikal-regio "(2008-20 Yugg,); interdisciplinair integratieproject nr. 93 "Ontwikkeling van onderzoek op het gebied van medische chemie en farmacologie als een wetenschappelijke basis voor de ontwikkeling van huisartsgeneesmiddelen"; een gezamenlijk project met de Academie van Wetenschappen van Mongolië "Het verkrijgen van nieuwe lipo-en nanosomale vormen van drugs met behulp van natuurlijke grondstoffen"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobiliteit van jonge wetenschappers" (2010), 11-03-90705-mob_st wetenschappelijk werk (training) van jonge Russische wetenschappers in de vooraanstaande wetenschappelijke organisaties van de Russische Federatie 2011 (2011).

Publications. Volgens de resultaten werden 17 wetenschappelijke artikelen gepubliceerd, waarvan er 3 werden gepubliceerd in tijdschriften die werden aanbevolen door de Higher Attestation Commission van het ministerie van Defensie en Wetenschap van de Russische Federatie.

De reikwijdte en structuur van het proefschrift. Het proefschrift wordt gepresenteerd op 172 pagina's met getypte tekst en bestaat uit introductie, literatuuroverzicht (1 hoofdstuk), experimenteel gedeelte (4 hoofdstukken), algemene conclusies, referentielijst en toepassingen. Het werk is geïllustreerd met 37 tabellen en 61 figuren. De bibliografische index bevat 139 bronnen, waaronder 42 buitenlandse.

In de inleiding wordt de relevantie van het onderwerp onderbouwd, het doel en de doelstellingen van het onderzoek geformuleerd, de wetenschappelijke nieuwheid en de praktische betekenis van het werk gepresenteerd.

Het eerste hoofdstuk (overzicht van de literatuur) presenteert gegevens over de chemische samenstelling, het spectrum van farmacologische activiteit, het gebruik van genus Artemisia L. in de traditionele en moderne medische praktijk.

Het tweede hoofdstuk (materialen en methoden) bevat gegevens over de onderzoeksobjecten, gebruikte methoden, apparaten en reagentia, andere methodologische informatie.

Het derde en vierde hoofdstuk bevatten gegevens over de studie van de anatomische en diagnostische symptomen van Severs S en een jaar oud. Op methode

UV-spectrofotometrie bepaalt het totale gehalte aan flavonoïden en tannines in de onderzoeksobjecten. Met behulp van GC-MS werd de kwalitatieve en kwantitatieve samenstelling van etherische olie en vetzuren van alsem onderzocht. De HPLC-MS-methode stelde het kwalitatieve en kwantitatieve gehalte aan flavonoïden vast. De elementaire samenstelling van planten werd bepaald volgens de AAS-methode. Een techniek voor het kwantificeren van het gehalte aan artemisinine is ontwikkeld en voorgesteld. door HPLC-MS. Daarnaast onderzochten we de chemische samenstelling van de etherische oliën van vijf soorten polynyas, meestal gevonden op het grondgebied van Boerjatië en Mongolië - Gmelin Artemisia gmelinii Web alsem. et Stechm., alsem, grijs Artemisia glauca Pall, ex Wild., alsem, grote-crested Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess., Sievers alsem Artemisia sieversiana Willd. en Artemisia annua L.

Het vijfde hoofdstuk geeft gegevens over de standaardisatie van het kruid van Sivers en P. van de eenjarige, voorgesteld als veelbelovende bronnen van respectievelijk chamazuleen en artemisinine.

De belangrijkste inhoud van het werk

Objecten en onderzoeksmethoden. De objecten van de studie waren monsters van gras van Sivers en jaarlijkse dorpen verzameld in verschillende districten van de Republiek Boerjatië (Ivolginsky, Pribaikalsky, Selenginsky, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) van de regio Irkutsk (Olkhon-eiland) en Mongolië (Selenginsky Aimak) uit 2008 tot 2011

Microscopische analyse werd uitgevoerd in overeenstemming met het artikel "Techniek van microscopische analyse" (GF XI, uitgave 2) op Mikmed-microscopen (Lomo, Rusland) met een oculair 10x; lenzen 4x, 10x, 40x en MS-300 (TFXS), Fluorescerende systeemset (Micros, Oostenrijk) met een oculair 10x; lenzen 4x, 10x, 40x. Het rendement van grondstoffen werd bepaald door de methode van boekhoudingssites.

Extractie van de etherische olie werd uitgevoerd door hydrodistillatie; extracten werden verkregen door ultrasone extractie, CO2-extractie en maceratie.

De studie van de kwalitatieve en kwantitatieve samenstelling van deze objecten werd uitgevoerd met de volgende methoden: GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, UV-spectrofotometrie en AAS. Chromato-massaspectrometrische analyse werd uitgevoerd op een Agilent 6890-gaschromatograaf met een HP MSD 5973N quadrupool-massaspectrometer (Agilent Technologies, VS; kolommen: HP-5ms, g = 0,25 mm, filmdikte 0,25 μm (copolymeer - 5%, difenyl) - 95% dimethylsiloxaan) en DBWax met een binnendiameter van 0,25 μm, draaggas - helium, g) stromen 1-1,5 ml / min; HPLC-MS-analyse werd uitgevoerd op high-performance vloeistofchromatografen Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, VS) en Agilent 1200 (Agilent Technologies,

VS) met massaselectieve detector "LCQ Advantage MAX" ("ion trap") van het merk "Finnigan" (Thermo Scientific, VS) en met een tandem massaspectrometrische detector ("ion trap") 6330 (Agilent Technologies, VS), methode ionisatie elektrospray; omstandigheden: Hypersyl Gold Cl8, 5 micron, kolommen van 150x4 mm (Thermo electronic corporation, VS) en Zorbax Eclipse C18, 5 micron, 4,6 * 150 mm (Agilent Technologies, VS), stroomsnelheid van het eluens 0,5 ml / min. TLC-analyse werd uitgevoerd op Sorbfil PTSH-P-A-UV-platen (Imid Ltd, Rusland); BC-analyse werd uitgevoerd op papier van FN 6 (Filtrak, Duitsland); Absorptiespectra werden opgenomen op een StellarNet Green Waiv spectrometer (StellarNet Inc., VS), AAC-analyse werd uitgevoerd op een SOLAAR MB spectrofotometer (Thermo scientific, USA) en Varían model AA240 (Varian, Rusland).

Statistische verwerking van experimentele gegevens werd uitgevoerd door de methode van variatie-statistische analyse. Een deel van de gegevens werd verwerkt door CIM (softwarepakket Sirius versie 6.0, Pattern Recognition Systems, a / s, Noorwegen).

Farmacognostische kenmerken van het kruid van P. Sivers en P. van de zomer. De volgende indicatoren voor de kwaliteit van medicinale grondstoffen. Graszoden alsem. Hele grondstoffen. Vaste of gedeeltelijk bladvormige toppen van bloeiende stengels van niet meer dan 45 cm lang, die geen grove delen van de stengel bevatten. Steel behaard, recht, geribbeld en vertakt. Radicale en middelste bladeren zijn gesteeld, breed driehoekige, driemaal geveerde, langwerpige platte plakjes, 1,4 - 2,5 cm lang, 0,1 - 0,5 cm breed Manden bolvormig, 0,4 - 0,6 cm in diameter, breed paniek bloeiwijze. Rand pistillate bloemen (er zijn ongeveer 18). Bloemen biseksueel, talrijk, met een trechtervormige kroon.

Gras alsem jaarlijks. Hele grondstoffen. Vaste of gedeeltelijk bladvormige toppen van bloeiende stengels van niet meer dan 50 cm lang, die geen grove delen van de stengel bevatten. De stengel is kaal, recht, gegroefd, groen aan het begin van het groeiseizoen, aan het einde donkerpaars. Het blad van de bladeren van de onderste en middelste stengel is eivormig of ovaal, 1,5-7,0 cm lang op de bladsteel, elliptisch in lengte, zonder vleugels, drie keer tot overexpressie gebracht in brede segmenten, segmenten en segmenten, 0,5 tot 0,8 cm lang, niet breed meer dan 0,2 cm., manden met een diameter van ongeveer 0,2 cm in een panische bloeiwijze.

Bij het uitvoeren van een anatomische studie van het gras van P. Sivers en P. één jaar, werden een aantal anatomische en diagnostische kenmerken geïdentificeerd. De structuur van de bladeren van alsem is weergegeven in Tabel 1. De stengel van Sivers alsem is grof, de langwerpige epidermis cellen.

Er zijn essentiële olieklieren, T-vormige haren en afgeronde stomatale cellen. De steel heeft een balktype structuur. In de ribben zijn delen van de slanke. Collanterale bundels gerangschikt in een cirkel worden gekenmerkt door sterk ontwikkelde sclerenchym. Goed gemerkt endoderm, bestaande uit grote, dunwandige cellen van een ronde vorm, strak naast elkaar.

Kenmerken van de anatomische structuur van de bladeren van p. Sivers en p. Een jaar __

Levert alsem alsem alsem alsem alsem

bovenste rechte muur

onderste wikkelingsmuur laag akelig

type bovenste anomocyt van het Ustigichesky-apparaat

lagere anomocytische stoma meer dan aan de bovenzijde van het blad

huidmondjes ovale vorm met linzen stomatale cellen

Kenmerken van haren die dicht behaard zijn met T-vormige haren bestaande uit twee-, viercellige poten en meercellige gevleugelde haren, er zijn twee soorten haren - stellatum en T-vormig met een meercellige poot

terpenoid-bevattende structuren zijn multicellulaire, grote etherische-olieklieren. schizogene recipiënten en niet-gespecialiseerde parenchymcellen

op het punt van één jaar oude, gegroefde, bijna kale stam, langwerpige epidermiscellen. In de stengel van de éénjarige, evenals in de stengel van s. Sivers, een puchkovy-achtige structuur, zijn er essentiële olieklieren, zelden haartjes en ovale stomatale cellen, worden collanterale stralen gekenmerkt door ontwikkelde sclerenchym, endoderm wordt tot expressie gebracht met grote, dunwandige cellen van cirkelvormige vorm naast elkaar. In beide soorten alsem, zijn de epidermale cellen op de bloemkroon van buisvormige bloemen dunwandig, langwerpig met spitse uiteinden, gekenmerkt door de aanwezigheid van een groot aantal essentiële olie klieren en de afwezigheid van haartjes.

Merchandising-indicatoren zijn vastgesteld voor verschillende partijen grondstoffen:

Graszoden alsem. Vochtigheid (niet meer dan 7%), totale as (niet meer dan 11%), as onoplosbaar in 10% zoutzuur (niet meer dan 2%), extractiemiddelen (niet minder dan 33%), laat bruin en zwart (niet meer dan 5%) ), organische onzuiverheid (niet meer dan 2%), minerale onzuiverheid (niet meer dan 0,5%).

Gras alsem jaarlijks. Vochtigheid niet meer dan 7%, totale as (niet meer dan 9%), as onoplosbaar in 10% zoutzuur (niet meer dan 1%), extractiemiddelen (niet minder dan 42%), laat bruin en zwart (niet meer dan 5%), organische onzuiverheid (niet meer dan 2%), minerale onzuiverheid (niet meer dan 0,5%).

Volgens de resultaten van een voorlopige fytochemische analyse, werden essentiële olie, flavonoïden, tannines, hydroxykaneelzuren, coumarines, vetzuren en sesquiterpene lactonen gevonden in het gras van Sivers en P.

Voorraden van Sivers en P. van een jaar. Tabel 2 geeft gegevens over de opbrengsten, biologische (BZ) en operationele reserves (EZ) van Sivers, en jaarlijks, groeiende in verschillende gebieden van Boerjatië.

Voorraden van grondstoffen van s. Sivers en p. Van een jaar in gebieden van Boerjatië

oogstgebied (g / m2) totale E-begroeiing, (ha) BS (kg) EZ (kg)

env. Gusinoozersk stad 58,0 ± 4,1 0,8 530,0 398,4

env. a. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 154,4 116,0

env. a. Boraat 220.6 ± 15.1 20.0 50160.0 41100.0

env. met Taphar 500.0 ± 26.3 0.5 2763.0 2237.0

env. a. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

env. Ulan-Ude 500.0 ± 32.5 0.5 2815.0 2175.0

District Kabansky 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Tunkinsky District 70.0 ± 8.0 0.2 172.0 108.0

Pribaikalsky District 280.9 ± 25.3 1.0 3315.0 2297.0

Kurumkansky wijk 370.6 ± 34.0 0.1 438.6 302.6

env. a. Hurumsha 228.0 ± 10.8 0.6 1497.6 1238.4

env. Bevolking 500.0 ± 46.2 30.0 177720.0 122280.0

env. a. Sotnikovo 39,0 ± 2,1 25,00 10800,0 8700,0

Kabansky District 400.0 ± 27.1 30.0 136260.0 103740.0

De productiviteit van het bovengrondse deel van de alsem Sivers en de jaarlijkse p. In de bestudeerde struikgewas varieert van 33.8 ± 2.4 tot 500.0 ± 32.5 g / m2 en van 39 ± 2.1 tot 500 ± 46.2 g / m2, respectievelijk. De biologische en operationele reserves van de bovengrondse delen van de bestudeerde planten zijn 154.4-97320.0 kg en 116.0-73680.0 kg (Sivers alsem), 1.497.6177720.0 kg en 1238.4-122280.0 kg (jaarlijkse alsem).

Chemische studie van het kruid van P. Sivers en P. van de jaarlijkse flavonoïden. Het totale kwantitatieve gehalte aan flavonoïden werd bepaald door de algemeen aanvaarde methode van spectrofotometrische bepaling in gras van Sivers en P. eenjarigen, in termen van luteoline-7-glucoside in verschillende fasen van de ontwikkeling van planten (vegetatie, ontluikende, bloeiende, vruchtlichamen). Het hoogste gehalte aan flavonoïden werd vastgesteld in monsters van Severs en een jaar oude monsters verzameld in de ontluikende fase - 0,68 en 0,66%, de laagste - in grondstoffen verzamelde grondstoffen - 0,31% en 0,38% (tabel 3).

Het kwantitatieve gehalte van de hoeveelheid flavonoïden in termen van luteoline-7-glucoside in het gras van P. Sivers en in het gras van P. één jaar, afhankelijk van de vegetatiefase

plant ontwikkelingsfase, de hoeveelheid flavonoïden, in termen van luteoline-7-glucoside (%)

Alsem voedt jaarlijks alsem

vegetatie 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

ontluikende 0.68 ± 0.05 0.66 ± 0.03

bloei 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

vruchtlichamen 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

De volgende flavonoïden werden gedetecteerd met de HPLC-MS-methode: rutine, luteoline-7-glucoside, chryo-eriol, quercetine in het gras van Sivers en in het gras van een jaar oud (figuur 1).

Fig.1. Chromatogram van flavonoïden en P. Sivers, P. één jaar.

De externe standaardmethode werd gebruikt om het kwantitatieve gehalte aan rutine, chryseriol, quercetine in het gras van Sivers en in het gras van de eenjarige te bepalen (Tabel 4).

In beide soorten alsem zit luteoline-7-glucoside tussen 0,04-0,08% (Sivers) en 0,88-1,77% (één jaar) in de grootste hoeveelheid, quercetine 0,001% (Sivers) en 0,0070,009% (n. jaarlijkse).

Het kwantitatieve gehalte aan flavonoïden (HPLC-MS)

Sivers Wormwood Flavonoid collection (%)

rutine quercetine luteoline-7-glucoside

Ivolginsky district, okr. a. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Ivolginsky district, okr. p. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

De VLIEG is een jaar oud en het Ivolginsky-district, okr. p. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Kabansky district, okr. a. Kakkerlak 0.012 ± 0.002 0.009 ± 0.0003 1.700 ± 0.005

Vetzuren. Alsemmonsters bevatten 8 tot 13 vetzuren. Gemeenschappelijk voor beide soorten zijn palmitine (16: 0), linol (18: 2p6), linolenic (18: ZpZ) zuren, in de hoeveelheid van 56,87-82,67% (van de totale vetzuren) in Severs, 58,36-67,19% in één jaar (van totale vetzuren). Naast deze zuren bevat een significante hoeveelheid 10-octadekeninezuur (18: 1p8) van 3,64% tot 11,65%. Ook in alle monsters werden 10-methyl-undecaan (¡° 12: 0) en 12-methyl-tetradecanoïsche (en 15: 0) zuren gedetecteerd, waarvan het gehalte niet meer dan 1% bedroeg. Chromatogrammen worden getoond in figuur 2.

Fig. 2. Chromatogrammen van vetzuren (a) p. Sivers en (b) p. Een jaar (I - (16: 0), 2 - (18: 2п6), 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1п8) ).

Elementaire samenstelling. In het gras van p. Sivers, dat in verschillende regio's van Buryatia groeit, is het calciumgehalte 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, magnesium - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Het hoogste gehalte aan calcium en magnesium wordt aangetroffen in monsters verzameld in het Kurumkansky-district, het laagste gehalte aan magnesium in de grondstoffen uit het district Tunkinsky en calcium in planten verzameld in het Selenginsky-district. IJzer wordt meestal gevonden in planten uit de regio Kurumkansky

(141,25 ± 12,13 mg / kg), minder - uit het Selenginsky-district (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Het gehalte aan zink varieert van 23,73 ± 1,56 tot 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. Sivers en van 55,32 ± 0,83 tot 66,50 + 0,89 mg / kg is een jaar oud, wat acceptabel is voor de normale werking van biochemische processen. Het kopergehalte is 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg -n. Sivers, 9,37 + 0,18 - 13,48 + 0,44 mg / kg - een jaar oud (de benodigde hoeveelheid is van 5 tot 30 mg / kg). Het nikkel in het gras van Seabera bevat 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, wat overeenkomt met een plantbehoefte van 0,1 tot 5 mg / kg. Het kobaltgehalte in de plant mag niet hoger zijn dan 1 mg / kg, lood - 10 mg / kg, cadmium - 0,2 mg / kg, chroom - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). In Sivers p. Het kobaltgehalte is minder dan 0,3 mg / kg, lood is 3,19 ± 0,11 mg / kg, in p. Een jaar oud - 0,59 ± 0,02 mg / kg, cadmium - 0,18 ± 0,02 mg / kg, chroom - 0,76 ± 0,02 mg / kg in alle monsters. Het gehalte aan macro- en micronutriënten ligt dus in concentraties die normaal en voldoende zijn voor de stroom van vitale functies voor planten.

Sizes alsem kruid etherische olie. Essentiële olie uit planten werd geïsoleerd volgens farmacopee nr. 2. In verschillende monsters van p. Sivers varieert het essentiële oliegehalte van 0,1 tot 1,9%. In de essentiële oliën van Sivers, die in verschillende delen van Buryatia groeien, zijn meer dan 80 verbindingen geïdentificeerd.

We hebben de samenstelling van etherische oliën geïsoleerd uit het gras van Sivers alsem onderzocht, die in verschillende delen van Buryatia groeit

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaikalsky (4.9),

Tunkinsky (5), Zakamensky-districten (8)), regio Irkoetsk (eiland Olkhon) (6) en Mongolië (7). De hoogste opbrengst aan essentiële olie zit in de alsmaar groeiende Sivers als Tunkinsky en Kurumkansky regio's (0,4%). De minimale hoeveelheid olie werd geïsoleerd uit planten die waren verzameld op het grondgebied van Zakamensky, Pribaikalsky regio's en Mongolië (0,1%) (figuur 3).

De dynamica van de accumulatie van essentiële olie werd bestudeerd afhankelijk van de fase van de ontwikkeling van de plant (figuur 4). De resultaten toonden aan dat in de grootste hoeveelheid de olie zich ophoopt in de bloeifase (0,6%), in

Fig. 3. De opbrengst aan essentiële olie p. Sivers vanaf de plaats van groei.

fasen van ontkiemen en vruchtvorming verzamelen dezelfde hoeveelheid essentiële olie (ongeveer 0,3%).

1- 1,8-daneol I-terpineal-4 3-p-pharmacne '1 ■ sishna-4,11-dnen

Fig. 5. Chromatogram van etherische olie p.

Fig. 4. De opbrengst aan etherische olie p.

Sivers in verschillende fasen van de ontwikkeling van planten (groeiseizoen, b - ontluikende, c - bloei,

Alle componenten van de etherische olie kunnen worden onderverdeeld in twee groepen - constant, dat wil zeggen, aangetroffen in de olie in alle fasen van de ontwikkeling van planten en sporadisch verschijnen (ondergeschikt). In alle monsters van de essentiële olie van Sivers, ongeacht het teeltoppervlak, 1,8-cineol (2,34-22,57%), terpineol-4 (0,964,70%), germacrene E (8,66-12,36%), P-farnezen (0,64-5,17%), Selina-4,11-dieen (0,97-4,66%), Neril-2-methylbutanoaat (4,80-8,79%) en Chamazuleen (0,60-25,36%) (figuur 5).

Essentiële oliën, geïsoleerd van planten die groeien in de steppegebieden, in de Pribaikalsky-wijk (25,36%), bevatten de kleinste hoeveelheid hamazuleen, de kleinste - in het Zakamensky-district (0,60%).

In de samenstelling van de essentiële olie geïsoleerd uit planten in verschillende ontwikkelingsfasen - vegetatie, ontluikende, bloeiende en vruchtdragende - werden 54 verbindingen geïdentificeerd. De constante componenten zijn 1,8-cyneol, linalool, terpineol-4, a-terpineol, p-farnezen, selina-4,11-dieen, chamazuleen.

Het gehalte aan chamazuleen varieert van 0,20 tot 24,69% in de vegetatiefase, van 21,34 tot 61,91% in de ontluikende fase, van 1,53 tot 34,42% in de bloeifase, van 10,87 tot 20,64% in de vruchtvormingsfase. De reeks sporadisch voorkomende componenten is significant (tot 40 verbindingen) tegelijkertijd hun lage kwantitatieve inhoud, daarom is het moeilijk om de afhankelijkheid van hun samenstelling op de fase van plantontwikkeling te identificeren.

Voor het beoordelen van de invloed van de ontwikkelingsfase op de componenten van de olie werd CIM gebruikt (Fig. 6).

Fig. 6. GK-model van samenstelling

essentiële olie uit de ontwikkelingsfase van Sivers (I-vegetatie, 2-ontluikend, 3-bloeiend, 4-vruchtend)

dit is een van de analyses

multidimensionale gegevens, waarmee verborgen variabelen in grote gegevensreeksen kunnen worden toegewezen en relaties kunnen worden geanalyseerd,

bestaande in het bestudeerde systeem. Het doel van de methode met de hoofdcomponent is om de oorspronkelijke beschrijving van monsters te vervangen door p-variabelen voor een nieuw formulier, weergegeven in de ruimte van de hoofdcomponenten (Esbenson, 2010).

Op het GK-model is het mogelijk om afzonderlijke van elkaar afgebakende gebieden te onderscheiden die overeenkomen met verschillende ontwikkelingsfasen van Sivers-alsem, wat aangeeft dat de samenstelling van de olie in verschillende ontwikkelingsstadia verschilt in het gehalte aan ondergeschikte verbindingen.

Dus, in verschillende fasen van de ontwikkeling van Sivers, valt de kwalitatieve samenstelling van de essentiële olie in constant samen en verschilt deze in minder belangrijke verbindingen.

Een onderzoek naar de fasen van de ontwikkeling van planten toonde aan dat de grootste hoeveelheid chamazuleen in de essentiële olie van Seversa geconcentreerd is in de ontluikende en bloeifase, terwijl de ophoping van olie in de bloeifase groter is dan in de ontluikende fase. Daarom hebben we tijdens deze fasen de eigenaardigheden van de ophoping van essentiële oliën in verschillende delen van de plant bestudeerd (figuur 7).

Over de fase van ontluiken In de bloeifase

Fig. 7. De opbrengst aan essentiële olie in verschillende delen van Sivers.

extraheerbare essentiële olie uit verschillende delen van planten in de bloeifase toonde aan dat bloeiwijzen (manden) worden gekenmerkt door de hoogste opbrengst, bladeren zijn kleiner en stelen zijn minimaal. In fase

ontluikend in het gras van P. Sivers zit vooral olie in de toppen, iets minder in de bladeren en de minimale hoeveelheid olie in de stengels.

Een analyse van de essentiële olie uit verschillende delen van de plant toonde aan dat de samenstelling van de olie die wordt geëxtraheerd uit de bloeiwijzen en grasknoppen van Sivers het meest divers is, meer dan 70 componenten is, dan zijn er meer dan 40 componenten uit de bladeren en minder dan alle verbindingen in de olie die uit de stelen wordt geëxtraheerd ongeveer 20 componenten. De constante componenten van de essentiële oliemonsters, ongeacht hun locatie, zijn 1,8-cyneol, linalool, terpineol-4, germacren 13, a-terpineol, a-bisabolol en chamazuleen (tabel 5).

Constant Components of Sants Wormwood Essential Oil

componentengehalte van componenten in% van de gehele olie

bloei fase ontluikende fase

bloeiwijzen bladeren stengels knoppen bladeren stelen

1,8-cineol 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

Linalool 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

terpineol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-terpineol 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7,20 7,81 1,96 11,18 7,81 10,57

a-bisabolol 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulene 6,23 23,02 37,11 7,81 21,17 3,51

De analyse toonde aan dat in verschillende groeigebieden, in verschillende ontwikkelingsfasen en in verschillende delen van Seversa, de kwalitatieve samenstelling van de essentiële olie in constant samenvalt en verschilt in sporadisch voorkomende verbindingen.

Etherische olie van alsem jaarlijks kruid. Zoals in het eerste geval, werd de selectie van de etherische olie uitgevoerd volgens farmacopee nr. 2. De chemische samenstelling van p. Jaarlijkse etherische oliën wordt vertegenwoordigd door 40 componenten. De constante componenten zijn artemisia keton (10.24-14.62%), caryophyllen (9.93-10.71%), germacrene B (3.53- 7.82%), p-seleneen (21.75-29.46%), karyofillen oxide (4.44- 14.31%) (Fig. 8).

In verschillende stadia van de ontwikkeling van planten wordt 0,5 tot 0,7% etherische olie gewonnen uit het kruid van de alsem. De hoogste opbrengst aan essentiële olie in de bloeifase (0,7%) (Fig.9).

In alle stadia van de ontwikkeling van planten, artemisia keton, karyofillen (3-selenium, karyophylne oxide) zijn opgenomen in de essentiële olie.Het kwantitatieve gehalte van de belangrijkste componenten in verschillende fasen van de ontwikkeling van de plant veranderingen.De inhoud van artemisia keton is het grootst in de vruchtvorming fase, P-seleneen - in de vegetatie fase, en karyofillen oxide - in de bloeifase.

3. Chromatogram van etherische olie p. Een jaar.

Fig. 9. De opbrengst aan essentiële olie p. Jaarlijks in verschillende fasen van de ontwikkeling van planten (in-vegetatie, b-knop, c-bloei, p-vruchtvorming).

De essentiële-olieklieren zijn ongelijk verdeeld in de plant, daarom kunnen uit verschillende delen van de plant essentiële oliën worden onderscheiden, die zowel kwantitatief als kwalitatief verschillen.

De eigenaardigheden van de ophoping van essentiële oliën in de bloeifase in verschillende delen van de jaarlijkse alsem (figuur 10) zijn bepaald.

Meer dan 60 verbindingen werden gevonden in essentiële oliën uit verschillende delen van de plant. constante

componenten voor oliën van bloeiwijzen, bladeren, stengels zijn artemisia alcohol, p-karyophillen, oxide

Het belangrijkste bestanddeel van de jaarlijkse essentiële olie is artemisia keton - het wordt niet gevonden in de olie van de stelen, hoewel het voor de helft in de olie zit van bloeiwijzen (49,14%) en bijna een derde van de bladeren (29,76%).

De analyse van etherische oliën toonde aan dat in verschillende groeigebieden, in verschillende ontwikkelingsfasen en in verschillende delen van het jaarlijkse gras, evenals in het gras van S. Sievers, de kwalitatieve samenstelling van de essentiële olie in constant en verschillend in sporadisch voorkomende componenten hetzelfde is.

Ontwikkeling van een methode voor kwantitatieve bepaling van artemisinine in alsem door een jaarlijkse HPLC-MS-methode

Selectie van voorwaarden voor de kwantitatieve extractie van artemisinine uit de jaarlijkse alsem. Een kwantitatieve methodologie ontwikkelen

1 2 van Fig. 10. De opbrengst van etherische olie in verschillende delen van de jaarlijkse (1-bloeiwijze, 2-bladen, 3-stengels).

Artemisininebepalingen in het gras van P. van één jaar oude extractiecondities werden geselecteerd waaronder de extractie van artemisinine de maximale waarde bereikt. De extracten verkregen door de maceratiemethoden, ultrasone extractie en subkritische CO2-extractie werden geanalyseerd. Verschillende oplosmiddelen werden als extractiemiddelen gebruikt (Tabel 6). Het gehalte aan artemisinine in extracten gescheiden door echografie-extractie en maceratie met verschillende oplosmiddelen is niet significant verschillend (0,038-0,040%). De grootste hoeveelheid artemisinine (0,054%) zit in het extract dat wordt verkregen tijdens subkritische CO2-extractie.

Methoden en parameters voor extractie van extracten uit het gras van alsem van één jaar oud door verschillende extractiemethoden ______

extractie methode extraheren extractie tijd / extractie parameters artemisinin gehalte in%, in termen van a.s.s.

ethanol 24 uur / verhouding van de grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), T = 25 ° С 0,040 ± 0,002

Maceratie ethanol 48 h / de verhouding van de grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), T = 25 ° С 0.038 ± 0.002

Hexaan 24 uur / Sample: oplosmiddelverhouding (1: 5), T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

ethylacetaat 15 min. / verhouding van uitgangsmaterialen: oplosmiddel (1: 5), sonderingsfrequentie 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

ethanol 5 min. / verhouding van grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), geluidsfrequentie 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Ultrasone extractie van ethanol 10 min. / Verhouding van grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), geluidsfrequentie 50 KHz, T = 25 ° С 0,024 ± 0,001

ethanol 15 min. / verhouding van grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), geluidsfrequentie 50 KHz, T = 25C, C 0,039 ± 0,002

ethanol 20 min. / verhouding van grondstoffen: oplosmiddel (1: 5), geluidsfrequentie 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

CO2-extractie van CO2 24 h.1 stroomsnelheid 30 l / uur, T = 20-22 ° C, P = 6.0-6.2MPa 0.054 ± 0.003

Van alle voorgestelde extractiemethoden is ultrasone extractie optimaal (ethanol-extractiemiddel), omdat deze methode snel is (extractietijd 15 minuten) en beschikbaar is via instrumentatie.

Methode voor kwantitatieve bepaling van artemisinine.

De ontwikkeling van een techniek voor de kwantitatieve bepaling van artemisinine in het kruid van de jaarlijkse is uitgevoerd door HPLC-MS. We gebruikten Agilent 1200 HPLC met een MC - detector ("ion trap") 6330, een ionisatiemethode - electrospray. Elutie werd uitgevoerd in isocratische modus (50% (A): 50% (B)), de samenstelling van de uitgangsbuffer (A) - waterige oplossing van mierenzuur (pH = 3) + 2 ml van een verzadigde oplossing van ammoniumacetaat, elutiebuffer (B) - 100% acetonitril. De volumetrische stroomsnelheid van het eluent is 0,5 ml / min, het volume van het geïnjecteerde monster is -25 μl. Ionen werden geregistreerd in de bewakingsmodus van positief geladen ionen (SRM) met een massa van 300 (vanwege de toevoeging van NrH4 ion aan het artemisinine molecuul), vensterbreedte (299301) m / z. De resultaten werden bevestigd door tandem-massaspectrometrie: een dochterion (MS2) met een massa van 223 m / z werd verkregen uit het moederion (MS) met een massa van 300 m / z.

Het samenvallen van retentietijden en massaspectra van artemisinine, bepaald in het gras van een jaar oud met behulp van de CO-oplossing van de aangegeven verbinding, laat ons concluderen dat de zuivere verbinding identiek is aan zuiver artemisinine (Fig. 11, 12).

Fig. 11. Chromatogram van CO artemisinine en P. jaarlijks extract.

iv ix язтжяауат ассс »

Figuur 12. Massaspectra van a) artemisinine vervat in n. Jaarlijks gras, b) van artemisinine CO.

Voor chromatografie-massaspectrometrie werd een absolute kalibratiemethode gebruikt voor kwantitatieve analyse. Om de coëfficiënt van de kalibratiecurve te bepalen, werden verschillende (ten minste 20) kalibratieoplossingen van artemisisinine bereid. Bereiding van oplossingen werd als volgt uitgevoerd: 5 * 10 "3 g artemisinine werd afgewogen, in een maatkolf van 50 ml geplaatst, 25 ml acetonitril werd toegevoegd.

grondig gemengd tot volledige oplossing, waarna het volume in de kolf met gedestilleerd water op het merkteken werd gebracht. Analyse uitgevoerd met ander volume van het geïnjecteerde monster van 1 tot 40 μl. Het piekoppervlak in de chromatogrammen werd gemeten. Volgens de verkregen gegevens werd een ijkcurve geconstrueerd (figuur 13). De waarden van het piekgebied werden uitgezet op de y-as en de overeenkomstige waarden van artemisininegehalte (g) werden uitgezet op de X-as.

Uit de verkregen gegevens werd de coëfficiënt van de kalibratiecurve berekend: к = Б / х, waarbij к de coëfficiënt van de ijkcurve is, 5 het piekgebied van de geanalyseerde oplossing, х is het gehalte aan artemisinine (g)

De coëfficiënt van de ijkcurve (k) wordt gedefinieerd als het rekenkundig gemiddelde van de coëfficiënten k,.

Fig. 13. Afstudeerdiagram voor het bepalen van het gehalte aan artemisinine.

Het artemisininegehalte in het éénjarige alsem-extract was bepaald door de formule: C = 5 / c, waarbij 5 het piekgebied van artemisinine in de geanalyseerde oplossing is en k de coëfficiënt van de kalibratiecurve is. Metrologische gegevens over de bepaling van de coëfficiënt van de ijkcurve (k) worden gegeven in tabel 7.

Metrologische kenmerken van de berekening van de coëfficiënt van de ijklijn artemisinine

1 X Э2 Э Р ЮУ) Дх Е,%

19 1.32 * 10m 1.84 * О15 4.25 * 10 "95 2.09 1.28 * 10" 1.97 1.90 * 10 "

De resultaten van de kwantitatieve bepaling van artemisinine in het jaarlijkse extract alsem worden gepresenteerd in tabel 8.

De resultaten van de kwantitatieve bepaling van artemisinine in het extract van alsem één-jaar-methode HPLC-MS

Metrologische kenmerken (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "'0,27 * 10" 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10 "'

De ontwikkelde methode bepaalde het kwantitatieve gehalte van artemisinine in het gras 1. Eenjarige in de bloeifase (Tabel 9). De techniek is gevalideerd - specificiteit, precisie bevestigd.

De inhoud van artemisinine in het gras alsem jaarlijks

Artemisinin gebied en datum van verzameling (%)

Ivolginsky-district, 10 km van Sotnikovo, 08/12/2010 0,054 ± 0,003

Ivolginhiy rn, 10 km van Sotnikovo, 22-08-2011 0,027 ^.001

Ivolginsky district, okr. a. Oriole, 19-08-2011 0,069 ± 0,004

Kabansky district, okr. a. Tarakanovka, 08.22.2011 0.023 ± 0.001

In monsters die in het Ivolginsky-gebied zijn verzameld, in de buurt van De Oriole bevat de hoogste hoeveelheid artemisinine (0,069%), de kleinste - in monsters van het Kabansky District, okr. a. Kakkerlak (0,023%). Vastgesteld werd dat de grootste hoeveelheid artemisinine-planten zich concentreert in de bloeifase - 0,039%, de kleinste - in de vegetatie- en ontkiemingsfase - van 0,006 tot 0,007%. Artemisinin bloeiwijzen bevatten - 0,029%, iets minder - 0,021% in de bladeren, en de minimale hoeveelheid in de stelen is 0,007% (Tabel 10).

De inhoud van artemisinine in het gras van de alsem jaarlijks, afhankelijk van de vegetatiefase, in verschillende delen van de plant

ontwikkelingsfase van de plant

vegetatie ontluikende bloeiende bladeren bloeiwijze stengels

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

De optimale tijd voor het verzamelen van gras van de jaarlijkse alsem is dus de bloeifase en het is raadzaam om het hele bovenstuk te verzamelen.

Alle verkregen resultaten zijn opgenomen in de FS-projecten op het gras van Sivers alsem en het kruid van de jaarlijkse alsem.

1. De belangrijkste diagnostische kenmerken van het gras van Sivers en P. 1-jaars gras werden onthuld, de numerieke indicatoren die nodig zijn voor de standaardisatie van grondstoffen werden ontwikkeld. De reserves van Sivers en P., die in verschillende delen van de Republiek Boerjatië groeien, worden geïdentificeerd.

2. Het gehalte aan flavonoïden, vetzuren, macro- en micronutriënten in het gras van Sivers n en in het gras van n. Een jaar werd vastgesteld. Flavonoïden - luteoline-7-glucoside, rutine, quercetine en chryoeriol werden gedetecteerd met de HPLC-MS-methode in deze planten. De belangrijkste vetzuren in de onderzochte soorten alsem zijn palmitisch, linolzuur, linoleenzuur, 10% octadekenisch zuur is ook te vinden in een grote alsem.

3. Er is vastgesteld dat de kwalitatieve samenstelling van etherische oliën van planten constant blijft, ongeacht de plaats van groei en de ontwikkelingsfase. De constante componenten van Sivers zijn 1,8-cyneol, terpineol-4, D germacren, p-farnesen, Selina-4,11-dieen, neyl-2-methylbutanoaat en chamazuleen, en Artemisia keton, karyofillen, germacrene één jaar oud D, p-seleneen, caryofiel oxide. De ophoping van essentiële olie in de bloeifase is groter (0,7%) dan in de ontluikende fase (0,3%). De grootste hoeveelheid chamazuleen p. Sivers hoopt zich op in de fasen van ontluikende (tot 62%) en bloei (tot 34%).

4. De voorwaarden voor de extractie van artemisinine (type extractiemiddel, extractiemethode, extractietijd) van het jaarlijkse kruid werden bepaald en er werd vastgesteld dat de maximale extractie van artemisinine wordt bereikt met ultrasone en precrigicale CO2-extractie. Een methode voor kwantitatieve bepaling van artemisinine werd ontwikkeld en gevalideerd in een één jaar durende HPLC-MS-methode (relatieve meetfout van ± 1,21%). Er is vastgesteld dat de grootste hoeveelheid artemisinine in het gras van een jaarlijks kruid accumuleert tijdens de bloeifase in bloeiwijzen (0,039%).

5. Ontwikkelde regulerende documenten voor grondstoffen - het project van FS "grass of Sivers alsmoor" en het project van FS van "Grass of alsem één jaar".

Lijst met artikelen gepubliceerd over het onderwerp van het proefschrift

1. Zhigzhitzhapova, C.B. De chemische samenstelling van de etherische olie Artemisia gmelinii Web. et Stechm, inheems in Centraal-Azië / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva en Plant Chemistry.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Chemische samenstelling van Sivers alsem essentiële olie Artemisia sieversiana Willd., Geteeld in Buryatia / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin van de Buryat State University. Ser. Chemie-Physics. - 2009. - Met. 3. - blz. 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Samenstelling van Sivers alsem essentiële olie Artemisia sieversiana Willd., Geteeld in Buryatia en de regio Irkutsk / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bulletin van het Oost-Siberische wetenschappelijke centrum van de Siberische afdeling van de Russische Academie voor Medische Wetenschappen. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. De samenstelling van de essentiële olie Artemisia sieversiana Willd. in verschillende fasen van plantontwikkeling / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Bulletin van het Oost-Siberische wetenschappelijke centrum van de Siberische afdeling van de Russische Academie voor Medische Wetenschappen. - 2011. - №1 (77). Deel 2. - blz. 138-141.

5. Soktoeva, TE De samenstelling van de essentiële olie Artemisia glauca Pall, ex Willd. flora van Mongolië / T.E. Soktoeva, S.V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Bulletin van jonge wetenschappers. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - blz. 27-30.

6. Soktoeva, TE De chemische samenstelling van de etherische olie Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: materialen van de XVI Intern. Conf. studenten, studenten en jonge wetenschappers. - Moskou, 2009. - blz. 37.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Etherische olie van alsem Gmelin-flora Buryatia en Mongolië / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Nieuwe resultaten in de chemie en chemische technologie van plantaardige grondstoffen": materialen van IV All-Rusland. wetenschappelijk. Conf. - Barnaul, 2009. - blz. 49-50.

8. Soktoeva, T.E. De samenstelling van de etherische olie van Sivers alsem Artemisia sieversiana Willd., Die groeit in de Republiek Buryatia / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Technologieën en apparatuur voor de chemische, biotechnologische en voedingsmiddelenindustrie": materialen van II Vseross. Scien. Conf. studenten, studenten en jonge wetenschappers. - Biysk, 2009. - blz. 91-93.

9. Pavlova E.T. Chromatografische scheiding en kwantitatieve bepaling van de componenten van geneesmiddelen door HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // "Problemen van duurzame ontwikkeling van de regio": materialen van het Vth School-Seminar of Young Scientists of Russia. - Ulan-Ude, 2009. - blz. 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Vergelijkende analyse van de chemische samenstellingen van Artemisia L., groeiend in Centraal-Azië / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // "Modem Methods of Data Analysis" Zevende wintersimposium over chemometrie. - Sint-Petersburg, 2010. - blz. 82-83.

11. Soktoeva, T.E. Vergelijkende analyse van de samenstelling van de etherische oliën van de polynia van het geslacht Artemisia L., geteeld in Centraal-Azië / TE Soktoeva // "Milieuvriendelijke en hulpbronnenbesparende technologieën en materialen": materialen van de regio, jeugdwetenschappelijk. Conf. van Intern. participatie. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Essentiële oliën van het geslacht Artemisia L. / C.B. polynia. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "De ontwikkeling van traditionele geneeskunde in Rusland: ervaring, onderzoek, perspectieven": materialen nauchn. Conf. van Intern. participatie. - Ulan-Ude, 2010. - blz. 405-407.

13. Soktoeva, T.E. De samenstelling van de etherische olie van broers en zussen alsem Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Actual studies of Baikal Asia": materialen van de stagiair. Scien. Conf, - Ulan-Ude, 2010. - blz. 309-312.

14. Badmaeva, E.E. De samenstelling van de etherische olie Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess. groeit in Mongolië / E.E. Badmaeva,

TE Soktoeva // "Ecologie van Rusland en aangrenzende gebieden": materialen van de XV International. milieu con. - Novosibirsk, 2010. - blz. 325.

15. Badmaeva, E.E. De samenstelling van de essentiële olie Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Milieuvriendelijke en hulpbronnenbesparende technologieën": materialen Vseross. jeugdconferentie. van Intern. participatie. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Extractie van artemisinine uit alsem jaarlijks Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Prioriteiten en kenmerken van de ontwikkeling van de Baikal-regio": materialen van de Vth international. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - blz. 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. De chemische samenstelling van Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Vegetatie van de regio Baikal en aangrenzende gebieden": materialen van Vseross. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - blz. 152-153.

AAS atomaire absorptie spectrofotometrie

vzmh absoluut droge grondstoffen

BAS biologisch actieve stoffen

GZ biologische reserves

BH-papierchromatografie

WHO Wereldgezondheidsorganisatie

HPLC-MS hoge-prestatie vloeistofmassa-chromatografie

GF Staat Farmacopee

ISC-methode van hoofdcomponenten

CO-standaardmonster

die dunne laag chromatografie

EZ operationele reserves

SRM Selecteer reactiemonitoring

De auteur betuigt zijn oprechte dank aan de promotor van studies, D.Sc., prof. LD Radnaeva, evenals Ph.D., universitair hoofddocent, senior onderzoeker Baikal Institute of Nature Management van de Siberische afdeling van de Russische Academie van Wetenschappen Zhigzhitzhapova C.B., Doctor in de Scheikunde, Honorary Professor Tomsk State University Ryzhova G.L. voor hulp en ondersteuning bij het opstellen van het proefschrift.

Het werd ondertekend in print 11/21/2011. Formaat 60x84 1/16. Offset papier. Volume 1,5pech. l. Circulatie 100. Bestelnummer 67.

Gedrukt in de drukkerij van de uitgeverij BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, Sakhyanova, 6.

Inhoudsopgave van Soktoev's these, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Hoofdstuk 1. HERZIENING VAN LITERATUUR

De huidige stand van onderzoek naar de studie van het geslacht Artemisia L.

1.1. Botanische kenmerken van alsem Alsem en 12e jaarlijkse alsem

1.2. Essentiële oliën en natuurlijke azuleenplanten van het geslacht Alsem

1.2.1. De chemische samenstelling van etherische oliën en natuurlijke azuleen 14 planten van het geslacht Alsem

1.2.2. Het gebruik van etherische oliën van planten van het geslacht Alsem in de geneeskunde

1.2. Artemisinine: ontdekking, structuur en synthese, fysisch-chemische 31 eigenschappen, mechanisme van antiplasmodiumwerking

1.3. Vetzuursamenstelling van planten van het geslacht Alsem

1.4. Fenolische verbindingen van planten van het geslacht Alsem

1.5. De elementaire samenstelling van planten van het geslacht Alsem 38 CONCLUSIES BIJ HET HOOFDSTUK

HOOFDSTUK 2. KENMERKEN VAN VOORWERPEN EN METHODEN 41 ONDERZOEK

2.1. Voorwerpen van studie, steekproeven van grondstoffen - gras van alsem Alsmeren en 41 kruiden alsem jaarlijks

2.2. Onderzoeksmethoden

2.2.1. Biologische onderzoeksmethoden

2.2.1.1. Anatomisch en diagnostisch onderzoek

2.2.1.2. Onderzoek naar bronnen

2.2.2. Methoden voor de kwalitatieve en kwantitatieve bepaling van 43 biologisch actieve stoffen

2.2.3. Merchandising Analysis: methoden voor het maken van 50 grondstoffen van goede kwaliteit

2.2.4. Methoden voor statistische verwerking. De belangrijkste componentmethode.

HOOFDSTUK 3. FARMACOGNOSTISCHE ANALYSE VAN KRUIDEN HERBALIS 53 RIVIEREN

3.1. Microscopische analyse van Sants alsem kruid

3.2. Sibers Alsemvoorraden

3.3. De studie van de voornaamste BAS-broers en zussen alsem

3.3.1. Kwalitatief en kwantitatief gehalte van de componenten 64 etherische olie van Sivers alsem

3.3.1.1. De chemische samenstelling en dynamica van de accumulatie van etherische olie en 64 hamazulena in het gras van Sivers alsem in verschillende delen van Buryatia

3.3.1.2. Eigenaardigheden van ophoping van etherische olie en chamazuleen in het gras van 65 Sivers alsem in verschillende fasen van de ontwikkeling van planten

3.3.1.3. De opeenhoping van ondergeschikte bestanddelen van de etherische olie van het gras. 71 Selt alsem

3.3.1.4. Kenmerken van de ophoping van etherische olie en chamazuleen in het gras 72 Sevens alsem van verschillende delen van de plant

3.3.2. Het kwalitatieve en kwantitatieve gehalte aan flavonoïden en tannines in het gras van Servels alsem

3.3.3. Vetzuursamenstelling van gras van Siers alsem

3.3.4. Elementaire samenstelling van de jaarlijkse alsem als kruid CONCLUSIES TOT HET HOOFDSTUK

HOOFDSTUK 4. FARMACOLOGISCHE ANALYSE VAN KRUIDENTHEBEN 83 ÉÉN JAAR

4.1. Microscopische analyse van het kruid alsem jaarlijks

4.2. Voorraden van alsem jaarlijks

4.3. De studie van de belangrijkste BAS-kruiden alsem jaarlijks

4.3.1. Het kwalitatieve en kwantitatieve gehalte van de componenten van de etherische olie in de alsem alsem jaarlijks

4.3.1.1. De chemische samenstelling en dynamica van ophoping van etherische olie in 92 grassen van eenjarige alsem uit verschillende groeiplaatsen

4.3.1.2. Eigenaardigheden van ophoping van etherische olie in het gras van alsem, jaarlijks op verschillende ontwikkelingsfasen en in verschillende delen van de plant

4.3.2. Kwalitatieve en kwantitatieve bepaling van flavonoïden gras 100 alsem jaarlijks

4.3.3. Vetzuursamenstelling van het kruid alsem jaarlijks ^ ® *

4.3.4. De elementaire samenstelling van de kruiden alsem jaarlijks

4.4. Ontwikkeling van een methode voor kwantitatieve bepaling van artemisinine in 103 gras van een alsem door een jaarlijkse methode van HPLC-MS

4.4.1. Selectie van voorwaarden voor de kwantitatieve extractie van artemisinine uit 103 éénjarige alsem

4.4.2. Ontwikkeling van een techniek voor kwantitatieve bepaling van artemisinine 104 door HPLC-MS

4.4.3. Kwantitatief gehalte van artemisinine in de jaarlijkse alsem van verschillende plaatsen van groei

4.4.4. Analyse van het kwantitatieve gehalte van artemisinine in de alsmaar jaarlijks op gele narcis grasland over verschillende ontwikkelingsfasen en in verschillende 'delen van de plant

HOOFDSTUK 5. DE INDICATOREN INSTELLEN 111 GOEDE MATERIALEN

5.1. Morfometrische indicatoren van grondstoffen

5.2. Standaardisatie van alsem in de broers en zussen van gras

5.2.1. Merchandising indicatoren gras Sills alsem!

5.2.2. Standaardisatie van Sivers alsem kruid volgens de inhoud van 115 hamazulelen in de samenstelling van etherische olie

5.2.3. Bepaling van de houdbaarheid van Sivers alsemgras

5.3. Standaardisatie van het kruid alsem jaarlijks ^ ^ ^

5.3.1. Grondstoffenindicatoren gras als een sagebrush jaarlijks * '^

5.3.2. Standaardisatie van het kruid alsem jaarlijks over de inhoud van artemisinine

5.3.3. Bepaling van de houdbaarheid van de alsem alsem jaarlijks

Inleiding Het thema van het proefschrift "farmaceutische scheikunde, farmacognosie," Soktoeva, Tuyana Erdemovna, abstract

Relevantie van het onderwerp. Planten van het geslacht Artemisia (alsem) zijn veelbelovende bronnen van biologisch actieve stoffen, zoals de dragon-alsem Artemisia dracunculus L., de alsem Artemisia absinthium L., de alsem Artemisia vulgaris L. wordt veel gebruikt in de volks-, traditionele geneeskunde en voedingsindustrie. Artemisia annua L., een jaarlijkse alsem, werd in veel landen met succes in cultuur geïntroduceerd en werd in 2001 door de WHO aanbevolen als de belangrijkste bron van artemisinine, de eerstelijnsbehandeling voor malaria. Tegenwoordig bieden landen die artemisinine produceren ongeveer een kwart van de wereldwijde gezondheidsbehoeften [1, 2]. N. Annual 137 toegewezen biologisch actieve verbindingen, waaronder 40 sesquiterpenen, 10 terpenen 7 coumarines, flavonoïden 46, die als basis voor geneesmiddelontwikkeling [3] kunnen dienen. In 80-er jaren van de twintigste eeuw een groep wetenschappers [4] pogingen kweek gezet wild n. Annual flora VILR USSR (Moscow). Tegenwoordig worden grote werken aan de introductie van het eerste jaars item uitgevoerd aan de Tomsk State University. In Buryatia n. Annual is een in het wild groeiende soort.

Samen met de n. Annual Boerjatië wijdverbreide Sievers alsem Artemisia sieversiana Willd., Die ook is het soort perspectief • voor de gezondheidszorg. In het gras van P. Sievers bevatten flavonoïden, essentiële oliën, coumarines [5-8].. Essentiële olie volgens conclusie Sievers van belang als bron chamazulen - een niet-toxische verbinding die een anti-inflammatoire, antibacteriële, werkzaamheid regeneratief [9, 10].

Doel: Farmacognostische studie van Servels alsem Artemisia sieversiana Willd. en alsem jaarlijks Artemisia annua L. als waardevolle bronnen van biologisch actieve stoffen.

Om dit doel te bereiken, is het noodzakelijk om de volgende taken op te lossen:

1. Identificeer de anatomische en diagnostische kenmerken van het bovengrondse deel van de n en p Sievers jaarlijks, aan merchandising indicatoren van grondstoffen, inventaris vast te stellen en de mogelijkheid om de jaarlijkse oogst n en n Sievers op het grondgebied van de Republiek Boerjatië evalueren....;

3. Een methode ontwikkelen voor de kwantitatieve bepaling van artemisinine in het bovengrondse deel van de eenjarige;

De vastgestelde kwaliteitsindicatoren van BAS zijn opgenomen in de regelgevingsdocumenten.

Praktische betekenis. Geïdentificeerd reserves en mogelijke jaarlijkse oogst Sievers n en n een jaar op het grondgebied van de Republiek Boerjatië.. (N Sievers -.. Van 0,1-73,7 ton per jaar, de jaarlijkse n-1,2-122,3 ton per jaar).

Uitgevoerd standaardisatie van grondstoffen, ontwikkeld FS projecten - "Gras Sievers alsem" en "Gras Artemisia annua".

Approbatie van werk. De belangrijkste bepalingen van het proefschrift werden gepresenteerd en besproken op: een wetenschappelijk-praktische conferentie met internationale participatie "De ontwikkeling van de traditionele geneeskunde in Rusland: ervaring, onderzoek en vooruitzichten" (Ulan-Ude, 2010); 7th Winter Simposium on Chemometrics "Modern Methods of Data Analysis" (Sint-Petersburg, 2010); de internationale wetenschappelijke conferentie gewijd aan de 15e verjaardag van de "Actual Studies of Baikal Asia" van de Buryat State University (Ulan-Ude, 2010); V internationale wetenschappelijk-praktische conferentie "Prioriteiten en kenmerken van de ontwikkeling van de Baikal-regio" (Ulan-Ude, 2011); X internationale wetenschappelijk-praktische conferentie "Problemen van de plantkunde in Zuid-Siberië en Mongolië" (Barnaul, 2011); IV All-Russian Conference "Nieuwe ontwikkelingen in de chemie en chemische technologie van plantaardige materialen" (Barnaul, 2009); XVI Internationale conferentie van studenten, postgraduates en jonge wetenschappers "Lomonosov-2009" (Moskou, 2009); XV International Ecological Student Conference "Ecologie van Rusland en aangrenzende gebieden" (Novosibirsk, 2010); II All-Russian wetenschappelijk-praktische conferentie van studenten, graduate studenten en jonge wetenschappers "Technologieën en apparatuur van de chemische, biotechnologische en voedingsmiddelenindustrie" (Biysk, 2009); All-Russian scientific-practical conference "De vegetatie van de Baikal-regio en aangrenzende gebieden" (Ulan-Ude, 2011); V School Seminar of Young Scientists of Russia "Problemen van duurzame ontwikkeling van de regio" (Ulan-Ude, 2009); de regionale jeugdwetenschappelijk-praktische conferentie met internationale participatie "Milieuvriendelijke en hulpbronnenbesparende technologieën en materialen" (Ulan-Ude, 2010).

Het werk werd uitgevoerd als onderdeel van onderzoeksprojecten: RFBR: No. 08-04-90202-Monga "Studie van de biogenetische patronen van biosynthese van biologisch actieve verbindingen van endemische planten in Centraal-Azië" (2008-2009), No. 08-04-9803 7-rsibirya en

De chemische samenstelling van planten als een indicator van de toestand van de ecosystemen van de Baikal-regio "(2008-2010); interdisciplinair integratieproject №93 "Ontwikkeling van onderzoek op het gebied van medische chemie en farmacologie als een wetenschappelijke basis voor de ontwikkeling van huisartsgeneesmiddelen"; een gezamenlijk project met de Academie van Wetenschappen van Mongolië "Het verkrijgen van nieuwe lipo-en nanosomale vormen van drugs met behulp van natuurlijke grondstoffen"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros "Mobiliteit van jonge wetenschappers" (2010), №11-03-90705-mobst wetenschappelijk werk (training) van jonge Russische wetenschappers in vooraanstaande wetenschappelijke organisaties van de Russische Federatie 2011 (2011).

Aan de verdediging worden genomen:

• de resultaten van de studie van de anatomische structuur, voorraden, criteria van authenticiteit van Sivers en P., die groeien in Boerjatië;

• resultaten van een chemische studie van biologisch actieve stoffen en hun seizoensgebonden dynamiek van accumulatie;

• resultaten van studies over de standaardisatie van het bovengrondse deel van Sivers p. En p. Een jaar.

Meer Artikelen Over Orchideeën

Winterbestendige klimrozen die de hele zomer bloeien

Kruiden

Hoe bamboe geluk thuis te verspreiden

Bloemen

Reproductie van Kalanchoe kalandiv. Kenmerken.

Bloemen

Bulb house bloemen: een verscheidenheid aan soorten

Bessen

Gedroogde bloemen: foto's en namen van de beste soort, geschikt voor zowel tuin als boeket

Meststoffen

Beschrijving en kenmerken van de 15 beste variëteiten cherrytomaatjes

Struiken

uitgave

Kruiden

Vortex bloemen

Struiken

Welke laagblijvende bloemen om in een bloembed te planten om de hele zomer te bloeien

Bloemen

Landscaping

Hoe is het landen en zorgen voor immortelle?
- Kruiden
Krullende vaste planten bloeien de hele zomer door
- Bloemen
Heliumballonnen: hoe verschillen ze van gewone ballonnen?
- Bloemen
Violet Transplant
- Kruiden
Hoe zwarte bessen van ziekten en plagen te spuiten?
- Korstmossen
Zinia Princess Park
- Meststoffen
Groeiend verbena zaad
- Kruiden
Welke planten zijn niet te laat om in juli te planten?
- Struiken

Meerjarige Bloemen

Artemisia artemisinine, extractie, malaria INHOUD IN ARTEMISIA ANNUA L EXTRACTEN ONTVANGEN DOOR VERSCHILLENDE METHODEN

introductie

Experimenteel gedeelte

Extractiemethoden en parameters

Bespreking van de resultaten

bevindingen

Artemisia annua L.
BTW beschrijving

Russische namen

taxonomie

image

Planten op de kaart

Botanische beschrijving

Samenvatting en proefschrift over geneeskunde (04/14/02) over het onderwerp: Farmacognostische studie van Artemisia annua L. en Artemisia sieversiana Willd. flora van Buryatia

Samenvatting van het proefschrift in de geneeskunde over het onderwerp Farmacognostische studie van Artemisia annua L. en Artemisia sieversiana Willd. flora van Buryatia

Inhoudsopgave van Soktoev's these, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Inleiding Het thema van het proefschrift "farmaceutische scheikunde, farmacognosie," Soktoeva, Tuyana Erdemovna, abstract

Meer Artikelen Over Orchideeën

Winterbestendige klimrozen die de hele zomer bloeien

Hoe bamboe geluk thuis te verspreiden

Reproductie van Kalanchoe kalandiv. Kenmerken.

Bulb house bloemen: een verscheidenheid aan soorten

Gedroogde bloemen: foto's en namen van de beste soort, geschikt voor zowel tuin als boeket

Beschrijving en kenmerken van de 15 beste variëteiten cherrytomaatjes

uitgave

Vortex bloemen

Welke laagblijvende bloemen om in een bloembed te planten om de hele zomer te bloeien

Begonia van thuis uit zaad laten groeien

Verlichtingsinstallaties. Deel 3: lampen voor installatieverlichting

Trimmen van klimrozen in het voorjaar

Artemisia artemisinine, extractie, malaria INHOUD IN ARTEMISIA ANNUA L EXTRACTEN ONTVANGEN DOOR VERSCHILLENDE METHODEN

introductie

Experimenteel gedeelte

Extractiemethoden en parameters

Bespreking van de resultaten

bevindingen

Artemisia annua L. BTW beschrijving

Russische namen

taxonomie

image

Planten op de kaart

Botanische beschrijving

Samenvatting en proefschrift over geneeskunde (04/14/02) over het onderwerp: Farmacognostische studie van Artemisia annua L. en Artemisia sieversiana Willd. flora van Buryatia

Samenvatting van het proefschrift in de geneeskunde over het onderwerp Farmacognostische studie van Artemisia annua L. en Artemisia sieversiana Willd. flora van Buryatia

Inhoudsopgave van Soktoev's these, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Inleiding Het thema van het proefschrift "farmaceutische scheikunde, farmacognosie," Soktoeva, Tuyana Erdemovna, abstract

Meer Artikelen Over Orchideeën

Artemisia annua L.
BTW beschrijving